移液器 按照原理可分為兩類,一類是空氣正壓式,另一類是活塞移動式。平常實驗室*常用到的是空氣正壓式,那么這次我們重點來講一下空氣正壓式移液器使用上的那些事!
選擇合適量程移液器,需遵循以下三個原則:
1. 量程內(nèi),即所需移取的體積必須在移液器的量程內(nèi);
2. 半量程,即所移取體積在所選移液器的半量程以上;
3. 就小不就大,即移取某體積的液體,應(yīng)選用*大量程較小的移液器。
以移取100微升液體為例:
當(dāng)吸頭與移液器的吸頭圓錐形狀符合時, 吸頭的密封性*佳。
吸頭穩(wěn)固地與吸頭圓錐結(jié)合, 即使斜靠容器壁操作時也不會發(fā)生松動。
不漏氣,確保準(zhǔn)確的結(jié)果!
選擇材料(純PP吸頭及PE濾芯) 的高度耐化學(xué)性保證結(jié)果的完整,
選擇形狀均一(吸頭直, 切口及表面平整光滑)的吸頭,能提高結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如像以下有彎頭、毛刺等問題的吸頭則不宜選用!
反復(fù)按動移液器感受整體情況,感受移液器是否松動。
調(diào)至中小量吹打10次左右,檢查槍的回位情況。
檢查是否漏液,是否長期沒有保養(yǎng)。
檢查是否漏液的方法:吸液后在液體中停1-3秒觀察吸頭內(nèi)液面是否下降,如果液面下降首先檢查吸頭是否有問題,如有問題更換吸頭,更換吸頭后液面仍下降說明移液器活塞組件有問題,可自行拆開保養(yǎng)或?qū)I(yè)維修人員修理。
必要的清潔,使用75%乙醇進行使用前清潔。
PS:小編嘔心瀝血編輯了好久后,突然發(fā)現(xiàn)本文好短啊有木有?但日常使用移液器,其實機器原理那些真的離我們很遙遠,我們只需要知道怎么用就可以了。所有濃縮的都是精華呀精華。
關(guān)于日常使用移液器的介紹,一共分為四個系列,分別是使用前、使用中、使用后、影響移液結(jié)果的因素??赐赀@四次推文,**不再是移液器小白了哦~
移液器又稱移液槍,是一種用于定量轉(zhuǎn)移液體的器具,被廣泛用于生物、化學(xué)等領(lǐng)域。
系列一我們講解了使用移液器前的,關(guān)于移液器的選擇、吸頭的選擇等等事項。這次,我們來看看移液器使用中的流程。
一個完整的移液循環(huán),包括吸頭安裝——容量設(shè)定——預(yù)洗吸頭——移液——排液——卸去吸頭等六個步驟。每一個步驟都有需要遵循的操作規(guī)范。
正確的安裝方法叫旋轉(zhuǎn)安裝法,具體的做法是,把白套筒頂端插入吸頭(無論是散裝吸頭還是盒裝吸頭都一樣),在輕輕用力下壓的同時,把手中的移液器按逆時針方向旋轉(zhuǎn)180度。切記用力不能過猛,更不能采取剁吸頭的方法來進行安裝,因為那樣做會對您手中的移液器造成不必要的損傷。
正確的容量設(shè)定分為兩個步驟,一是粗調(diào),即通過排放按鈕將容量值迅速調(diào)整至接近自己的預(yù)想值;二是細調(diào),當(dāng)容量值接近自己的預(yù)想值以后,應(yīng)將移液器橫置,水平放至自己的眼前,通過調(diào)節(jié)輪慢慢地將容量值調(diào)至預(yù)想值,從而避免視覺誤差所造成的影響。
在容量設(shè)定時,還有一個需要特別注意的地方。當(dāng)我們從大值調(diào)整到小值時,剛好就行;但從小值調(diào)整到大值時,就需要調(diào)超三分之一圈后再返回,這是因為計數(shù)器里面有一定的空隙,需要彌補。
在我們安裝了新的吸頭或增大了容量值以后,應(yīng)該把需要轉(zhuǎn)移的液體吸取、排放兩到三次,這樣做是為了讓吸頭內(nèi)壁形成一道同質(zhì)液膜,確保移液工作的精度和準(zhǔn)度,使整個移液過程具有極高的重現(xiàn)性。其次,在吸取有機溶劑或高揮發(fā)液體時,揮發(fā)性氣體會在白套筒室內(nèi)形成負壓,從而產(chǎn)生漏液的情況,這時就需要我們預(yù)洗四到六次,讓白套筒室內(nèi)的氣體達到飽和,負壓就會自動消失。
移液方式有兩種。
正向移液:
操作時吸液可將按鈕按到**檔吸液,釋放按鈕。
放液時先按下**檔,打出大部分液體,再按下**檔,將液體排出。*常用的移液技術(shù), 適用于大容量、水溶液、含少量清潔劑或蛋白質(zhì)的液體有機溶劑,并且正向移液方式是必須需要預(yù)潤洗吸頭的!
反向移液:
吸液時將按鈕直接按到**檔再釋放,這樣會多吸入一些液體,排出液體時只要按到**檔即可。
用于特殊液體或?qū)?zhǔn)確度和**度要求特別高的應(yīng)用。移液器吸入設(shè)定容量 + 額外容量來改善結(jié)果, 適用于生物流體、 泡沫液體(含蛋白質(zhì)或清潔劑)、粘稠液體、小容量液體。
排液時,吸頭緊貼容器壁,先將排放按鈕按至**停點,略作停頓以后,再按至**停點,這樣做可以確保吸頭內(nèi)無殘留液體。如果這樣操作還有殘留液體存在的話,您就應(yīng)該考慮更換吸頭了。
卸掉的吸頭一定不能和新吸頭混放,以免產(chǎn)生交叉污染。
這次我們主要講解關(guān)于使用移液器后的操作,以及影響移液結(jié)果的因素。
將移液器調(diào)節(jié)至*大量程、對移液器進行合理清潔、將移液器放置于移液器架上。
定期清潔我們手中的移液器,用酒精棉即可,主要擦拭手柄、彈射器及白套筒外部,既可以保持美觀,又降低了對樣品產(chǎn)生污染的可能性。
在吸取過高揮發(fā)、高腐蝕液體后,應(yīng)將整支移液器拆開,用蒸餾水沖洗活塞桿及白套筒內(nèi)壁,并在晾干后安裝使用。以免揮發(fā)性氣體長時間吸附于活塞桿表面,對活塞桿產(chǎn)生腐蝕,損壞您的移液器。
套筒與活塞系統(tǒng)漏氣、吸頭匹配性差(吸頭不密封),這部分對移液結(jié)果影響*大,高達50%。
因此,平常應(yīng)該尤其關(guān)注:移液器的保養(yǎng)、吸頭與移液器的兼容性、根據(jù)不同應(yīng)用選擇合適類型的吸頭、關(guān)注吸頭的質(zhì)量!
吸頭的重復(fù)使用、排液時沒將吸頭靠在容器壁上操作、移液環(huán)境的濕度不穩(wěn)定、未預(yù)潤洗吸頭、移液操作的節(jié)奏不均一、吸頭浸入液面的深度及移液的角度!
正確的移液方式應(yīng)為:
吸液時保持移液器垂直 —— 將吸頭浸入液面以下2-3m —— 移液(正向) 前預(yù)潤洗3-5次 —— 吸液后等待一下 —— 以30 – 45° 角度排液 —— 排液時將吸頭貼靠在容器內(nèi)壁操作 —— 平滑、 一致地用拇指操作。
不均一的活塞移動、移液器、 吸頭、 液體與室溫有溫差(達到0,3%/C?)、
溫度:移液器、 吸頭及液體件的溫度差異越小,結(jié)果的準(zhǔn)確度越高。 1?C的溫度變化會0,3% 的結(jié)果誤差。
空氣濕度:增加空氣的濕度能夠消除液體的蒸發(fā)??梢酝ㄟ^預(yù)潤洗, 在移液器&吸頭的組合內(nèi)創(chuàng)造一個濕潤的環(huán)境,或在天平中使用蒸發(fā)阱。
氣壓:當(dāng)接近海平面時, 氣壓對結(jié)果的影響很小。當(dāng)在海拔較高的地方時, 應(yīng)當(dāng)考慮到氣壓對結(jié)果的影響, 并且移液器需要經(jīng)常校準(zhǔn)以獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。在校準(zhǔn)過程中, 必須知道氣壓來確定質(zhì)量轉(zhuǎn)化為容量的Z-系數(shù)。
看完整個系列,
相信大家都擺脫移液器小白啦哈哈哈~~
但是,
光有理論怎么行!!
必須實操。
什么?還沒有移液器?
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