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純!干!貨!色譜柱應(yīng)用分享集(一)~ 選柱子終于可以踩少一點(diǎn)坑~

你是色譜達(dá)人,喜歡分享色譜分析經(jīng)驗(yàn)嗎?

你是色譜小白,有這樣那樣的色譜問(wèn)題嗎?


你是否想獲得更多的行業(yè)信息?是否想跟同行交流經(jīng)驗(yàn)不知在何處實(shí)現(xiàn)?

是否遇到色譜柱壓力高、峰型前沿or拖尾、保留時(shí)間變化、重現(xiàn)性不好,壽命很短等色譜方面問(wèn)題的困擾?




如何在品牌廠商眾多的市場(chǎng)里為當(dāng)前開(kāi)展的各類(lèi)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目選到合適的色譜柱?

這個(gè)問(wèn)題長(zhǎng)期困擾著大多數(shù)色譜達(dá)人。


而無(wú)論是研發(fā)人員看重的新方法建立時(shí)效性,還是質(zhì)檢人員更關(guān)注的耐用性,

為了選擇到滿意的柱子,絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員的做法都是將實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的色譜柱都試上幾遍,但通常結(jié)果是不得而終的。




色譜圈作為一個(gè)10多萬(wàn)色譜達(dá)人交流的平臺(tái),全新推出色譜應(yīng)用分享專(zhuān)輯,將大多數(shù)客戶反映良好的色譜柱應(yīng)用分享,讓大家做選柱參考,避免花費(fèi)大量時(shí)間和**成本去試柱子。


無(wú)論您是色譜達(dá)人還是色譜小白,在色譜圈平臺(tái)都可以獲得更多信息、豐富經(jīng)驗(yàn),讓你的問(wèn)題得到解決。


本期知識(shí)點(diǎn)
塔板數(shù)低、色譜柱易變性、色譜柱壽命短、保留時(shí)間變化、定量精度差、出現(xiàn)新的干擾峰等色譜行為,可能都是源于選擇了不適合的色譜柱


1
中國(guó)藥典方法2015版 —— 蜂蜜中糖類(lèi)的檢測(cè)




用戶測(cè)評(píng)

問(wèn)

中國(guó)藥典中測(cè)定蜂蜜要求采用的Grace廠家Prevail Carbohyrate ES色譜柱,而這個(gè)柱子已經(jīng)停產(chǎn)了;試過(guò)很多其他廠商的氨基柱測(cè)定的峰型大多比較差,進(jìn)樣幾百針色譜柱已經(jīng)不能使用了

專(zhuān)家測(cè)評(píng)

Prevail CarbohyrateES色譜柱是聚合物氨基柱,自從Grace被并購(gòu)后,該色譜柱已經(jīng)停產(chǎn),導(dǎo)致一段時(shí)間市場(chǎng)柱子缺貨,普通的硅膠基質(zhì)氨基柱在測(cè)定還原性糖容易被固定相吸附導(dǎo)致柱校低、回收率低、色譜柱壽命比較短,而shodex NH2P-50 4E是聚合物基質(zhì)填料氨基柱,用戶普遍反映其化學(xué)穩(wěn)定性好,壽命長(zhǎng),是完全可以替代的藥典規(guī)定的色譜柱的!


2
中國(guó)藥典方法2015版 —— 溶出度試驗(yàn)下阿奇霉素含量的檢測(cè)



用戶測(cè)評(píng)

問(wèn)

測(cè)定阿奇霉素溶出度試驗(yàn)含量時(shí),我們?cè)诤Y選色譜柱時(shí)候,嘗試多個(gè)廠商的C18柱,但分離效果普遍不理想,主要體現(xiàn)為柱子壞的很快,分離效果差,壽命短

專(zhuān)家測(cè)評(píng)

阿奇霉素含量測(cè)定本身也是難點(diǎn),普通硅膠基質(zhì)C18柱檢測(cè)效果比較差,通過(guò)比較Shodex Asahipak ODP-50 4E是聚合物填料的C18柱,在測(cè)定阿奇霉素項(xiàng)目上分離效果和柱壽命相對(duì)于其他的色譜柱都是更理想的



3
GB/T14204-1993水質(zhì)中烷基汞檢測(cè)(毛細(xì)管柱方法)



用戶測(cè)評(píng)

問(wèn)

分析水中的烷基汞采用過(guò)填充柱和毛細(xì)柱,如-5、-5、-1701等,做出來(lái)大都出現(xiàn)了不出峰、峰拖尾、響應(yīng)低、穩(wěn)定性差、檢測(cè)限低、標(biāo)準(zhǔn)曲線線性差等問(wèn)題

專(zhuān)家測(cè)評(píng)

填充柱和普通毛細(xì)柱因?qū)ν榛菀桩a(chǎn)生吸附現(xiàn)象導(dǎo)致不出峰、響應(yīng)差、峰拖尾等一系列問(wèn)題,而ShinwaULBON HR-******n-HG專(zhuān)用柱對(duì)烷基汞不容易產(chǎn)生吸附現(xiàn)象,因此在測(cè)定時(shí)靈敏度高、重現(xiàn)性、線性都能達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求


4
中國(guó)藥典方法2015版 —— 硫酸氫氯吡格雷光學(xué)異構(gòu)體的檢測(cè)




用戶測(cè)評(píng)

問(wèn)

中國(guó)藥典規(guī)定下檢測(cè)硫酸氫氯吡格雷片兩個(gè)光學(xué)異構(gòu)體所選用的是以卵粘蛋白鍵合硅膠為填充劑的手性色譜柱(ULTRONES-OVM),分離度和峰型都比較滿意

專(zhuān)家測(cè)評(píng)

Shinwa Ultron ES-OVM色譜柱,也是USP固定相L57色譜柱;該色譜柱除了是可以檢測(cè)硫酸氫氯吡格雷片兩個(gè)光學(xué)異構(gòu)體,還是檢測(cè)奧硝唑、鹽酸托哌酮等的專(zhuān)用柱

5
中國(guó)藥典方法2015版 —— 天麻飲片中天麻素和對(duì)羥基苯甲醇含量檢測(cè)




色譜柱:ECOSIL AQ C18 4.6×250mm,5um


用戶測(cè)評(píng)

問(wèn)

中國(guó)藥典規(guī)定檢測(cè)天麻中天麻素和對(duì)羥基苯甲醇含量中流動(dòng)相采用乙腈-0.05%磷酸溶液(3 : 97),用普通C18檢測(cè)柱子損壞的比較快


專(zhuān)家測(cè)評(píng)

一些中藥材中有效成分極性比較大,在檢測(cè)極性大的物質(zhì)通常需要采用親水型的C18柱,這樣增加被分析物的保留,色譜柱穩(wěn)定性和壽命也相應(yīng)增大


6
某眼內(nèi)灌注液中醋酸鈉和枸櫞酸鈉含量測(cè)定




色譜柱:Ecosil AQ-C18柱 (250mm×4.6mm, 5μm)


用戶測(cè)評(píng)

問(wèn)

在分離醋酸鈉和枸櫞酸鈉用過(guò)好幾款C18柱色譜柱,但不僅柱子損壞快,壽命短并且還會(huì)出現(xiàn)峰拖尾


專(zhuān)家測(cè)評(píng)

醋酸鈉和枸櫞酸鈉也是極性較大的物質(zhì),并且還是堿性化合物這類(lèi)物質(zhì)也可采用親水性色譜柱,AQ-C18是因?yàn)樵阪I合C18鏈時(shí)候嵌入極性基團(tuán),而且也是端基封端的,堿性化合物檢測(cè)不易發(fā)生峰拖尾的情況!


7
按照GB/T5009.248-2016方法測(cè)定食品中葉黃素



色譜柱:EcosilC30 4.6×250mm  5μm


用戶測(cè)評(píng)

問(wèn)

在17年國(guó)標(biāo)中對(duì)測(cè)定食品中葉黃素方法進(jìn)行了升級(jí),規(guī)定需采用的C30色譜柱,一直用YMC 的C30色譜柱,但價(jià)格都比較貴!


專(zhuān)家測(cè)評(píng)

目前市面上采用YMC C30色譜柱比較多,實(shí)際上有不少小伙伴反應(yīng)ECOSIL C30色譜柱在測(cè)定食品中葉黃素是完全符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定要求的!


8
按照GB/T20759-2006方法測(cè)定雞肉中的磺胺類(lèi)物質(zhì)殘留



色譜柱: C-C18(2.7μm,4.6×75mm)


用戶測(cè)評(píng)

問(wèn)

在測(cè)定磺胺類(lèi)的殘留時(shí)候總會(huì)遇到峰型拖尾,色譜柱壽命短,分析時(shí)間相對(duì)長(zhǎng)


專(zhuān)家測(cè)評(píng)

薄殼層填料色譜柱,僅在表面薄殼內(nèi)進(jìn)行吸附分配,降低傳質(zhì)擴(kuò)散,因此采用該類(lèi)型柱子在達(dá)到同等柱校情況下可以使用更短的柱子節(jié)省分離時(shí)間和溶劑從而節(jié)省成本



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