霉菌**主要是指霉菌在其所污染的食品或是飼料中產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物，在飼料的加工、運(yùn)輸和貯存過(guò)程中都可能會(huì)產(chǎn)生。據(jù)統(tǒng)計(jì)，已知的霉菌**有300多種，常見的**有：黃曲霉**，玉米赤霉烯酮/F2**，赭曲**，T2**，煙曲霉**，赭曲霉**，嘔吐**，麥角**等。
霉菌**污染多為復(fù)合型，飼料中大多存在3種以上的霉菌**污染。霉菌**通過(guò)飼料或食品進(jìn)入人和動(dòng)物體內(nèi)，引起人和動(dòng)物的急性或慢性毒性，損害機(jī)體的肝臟、腎臟、神經(jīng)組織、造血組織及皮膚組織等。因此，霉菌**的檢測(cè)必須引起重視，防患于未然。
飼料中霉菌**檢測(cè)方法主要有目測(cè)法，薄層色譜法（TLC），高效液相色譜法（HPLC），酶聯(lián)**吸附法（ELISA），放射**法（KIA）及快速試紙檢測(cè)法。
其中酶聯(lián)**吸附法（ELISA）此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái)，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。經(jīng)過(guò)三四十年發(fā)展，ELISA技術(shù)已經(jīng)作為一個(gè)成熟的快速篩選方法，應(yīng)用于不同的行業(yè)，美國(guó)USDA，EPA將眾多ELISA的方法作為官方快速篩選方法。
酶聯(lián)**吸附法（ELISA）的基本原理是，在合適的載體上，酶標(biāo)記抗體或抗原與相應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合成酶標(biāo)記抗體抗原復(fù)合物，在酶底物的參與下，復(fù)合物上的酶催化底物使其水解成為另一種帶色物質(zhì)，其核心就是讓抗體與酶復(fù)合物結(jié)合，然后通過(guò)顯色深淺來(lái)進(jìn)行分析。
該法優(yōu)點(diǎn)突出，1）靈敏度高，干擾?。嚎贵w抗原的**反應(yīng)特異性很強(qiáng)，結(jié)構(gòu)類似物、熒光物質(zhì)、有色物質(zhì)對(duì)檢測(cè)的干擾很小。2）操作簡(jiǎn)便快捷：由于特異性強(qiáng)，簡(jiǎn)化了樣品的預(yù)處理和提取純化過(guò)程，同時(shí)測(cè)定時(shí)間短。3）**性高，污染少，成本低廉：不需要昂貴的測(cè)定儀器，且所用試劑也相對(duì)較少，**標(biāo)準(zhǔn)品的濃度可以很低，減少了對(duì)檢測(cè)人員和環(huán)境的潛在危害和污染。尤其適用于大批量樣品的快速測(cè)定。
ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。根據(jù)待測(cè)物的情況及檢測(cè)的具體條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。如：雙抗體夾心測(cè)抗原、雙抗體夾心測(cè)抗體、間接法測(cè)抗原、間接法測(cè)抗體、競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原、競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體等，目前的試劑盒大多屬于抗體包被直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法。
目前國(guó)際上比較認(rèn)可的霉菌**檢測(cè)模式是，試劑盒篩選加大型儀器確證方法配合使用。試劑盒應(yīng)用于樣品的實(shí)驗(yàn)室快速篩選，結(jié)果準(zhǔn)確性比較高，對(duì)于大批量的樣品測(cè)定分析可有效節(jié)約成本，縮短分析時(shí)間。
1，稱粉碎好的樣品5g
2，加入0.5gNaCl
3，加入25mL70%甲醇/水
4，超聲萃取5min
5，4000轉(zhuǎn)離心5min
6，離心后的樣品取上清液過(guò)玻璃纖維濾紙過(guò)濾
7，加入100ul的酶標(biāo)記物到混合孔，再加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品及樣品到相應(yīng)混合孔，混勻后轉(zhuǎn)移100ul到相應(yīng)的測(cè)試孔中。加入50ul抗體到對(duì)應(yīng)的每一個(gè)測(cè)試孔。
8，震蕩5s，20-28℃孵育10min
9，清洗液洗板4次
10，加入100ul顯色液,顯色8min
11，顯色8min后
12，加入100ul停止液，讀板。
根據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)品的顏色比對(duì)來(lái)進(jìn)行快速篩選，對(duì)于霉菌**處于國(guó)家規(guī)定限量范圍左右的樣品可再通過(guò)大型儀器進(jìn)行更精準(zhǔn)的定量分析。
Beacon試劑盒
Casco試劑盒和**親和柱
廣州綠百草供應(yīng)美國(guó)Beacon試劑盒和Casco試劑盒，Casco試劑盒采用國(guó)外的固相包被技術(shù)，且固相載體包被的是二抗，穩(wěn)定性更高質(zhì)量可靠，超高的性價(jià)比，現(xiàn)更可提供試用機(jī)會(huì)，另外也供應(yīng)Beacon和Casco**親和柱，可用于前處理起提取凈化作用。
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