色譜法是一種分離混合物成分的過(guò)程。色譜法利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配,以流動(dòng)相對(duì)固定相中的混合物進(jìn)行洗脫,混合物中不同的物質(zhì)會(huì)以不同的速度沿固定相移動(dòng),zui終達(dá)到分離的效果。
混合物的不同成分以不同的速度通過(guò)固定相,使它們彼此分離。特定流動(dòng)相和固定相的性質(zhì)決定了哪些物質(zhì)的移動(dòng)速度更快或更慢,以及它們的分離方式。這些不同的行程時(shí)間稱為停留時(shí)間。
“書(shū)寫(xiě)顏色”
色譜法得名于19世紀(jì)末首 次用于分離復(fù)雜混合物中色素的技術(shù)。
如果一張紙或一塊布接觸到一個(gè)裝滿水或酒精的容器,其中溶解了一種復(fù)雜的顏料,毛細(xì)作用會(huì)將混合物帶到紙或布上,但顏料的成分不會(huì)以相同的速率移動(dòng)。
混合物中zui大的分子將移動(dòng)得更慢,而zui小的分子則會(huì)領(lǐng) 先,從而導(dǎo)致固定相形成與混合物中每個(gè)組分相對(duì)應(yīng)的離散色帶。這使該技術(shù)被命名為“色譜法”或“書(shū)寫(xiě)顏色”
從藝術(shù)到科學(xué)
色譜儀zui初是由藝術(shù)家、色彩理論家和工匠使用的,他們希望將工業(yè)染料用于紡織品。隨著時(shí)間的推移,它也催生了一個(gè)獨(dú)特的化學(xué)分支,以及今天用來(lái)理解和純化混合物的技術(shù)。
在現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室中,顏色方面不再重要,但同樣的原則適用。通過(guò)將目標(biāo)混合物溶解在流動(dòng)相中并通過(guò)固定相運(yùn)輸,混合物的成分可以根據(jù)其不同的移動(dòng)速度彼此分離。
通過(guò)改變流動(dòng)相、固定相和/或決定移動(dòng)速度的因素,創(chuàng)建了多種色譜方法,每種方法用于不同的目的,適用于不同的混合物。一些zui常見(jiàn)的色譜形式如下。
? 在氣相色譜法中,目標(biāo)混合物被蒸發(fā),并與惰性氣體(通常為氮?dú)饣蚝猓┮黄鹜ㄟ^(guò)固定相(通常為金屬或玻璃分離柱)?;旌衔镏休^大的分子通過(guò)色譜柱并到達(dá)遠(yuǎn)端檢測(cè)器所需的時(shí)間較長(zhǎng)。
? 在液相色譜法中,目標(biāo)混合物溶解在液體中并通過(guò)通常由二氧化硅材料制成的固體固定相。根據(jù)流動(dòng)相和固定相(正相與反相)的相對(duì)極性以及流動(dòng)相是否加壓(高效),存在多種液相色譜法。
? 在薄層色譜法(TLC)中,固定相是一薄層固體材料,通常以二氧化硅為基礎(chǔ),而流動(dòng)相是一種液體,其中溶解了目標(biāo)混合物。
? 離子交換色譜法根據(jù)混合物的電荷、大小或大小來(lái)分離混合物的成分。本質(zhì)上,正(陽(yáng)離子)或負(fù)(陰離子)帶電離子通過(guò)不同的固定相和不同的pH流動(dòng)相分離。
色譜法可用作分析工具,將其輸出輸入檢測(cè)器,檢測(cè)器讀取混合物的內(nèi)容。它也可以用作凈化工具,分離混合物的成分,用于其他實(shí)驗(yàn)或程序。通常,分析色譜法使用的材料數(shù)量比色譜法要少得多,用于純化混合物或從中提取特定成分。
例如,固相萃取是一種液相色譜法,其中順序使用不同的流動(dòng)相來(lái)分離固相中捕獲的混合物的不同成分。色譜法作為一種凈化技術(shù)在石化和其他有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室中發(fā)揮著重要作用,在這些實(shí)驗(yàn)室中,色譜法可以成為從有機(jī)溶液中去除雜質(zhì)的更具成本效益的方法之一,特別是如果混合物的組分是熱敏性的。
靈活性
色譜法的原理也出現(xiàn)在其他實(shí)驗(yàn)室技術(shù)中。凝膠電泳根據(jù)核酸和蛋白質(zhì)的大小對(duì)它們進(jìn)行分類,通過(guò)電場(chǎng)將它們拉過(guò)凝膠。 這種技術(shù)實(shí)際上是一種色譜法。類似地,蒸餾通過(guò)沸點(diǎn)和冷凝點(diǎn)對(duì)混合物的成分進(jìn)行分類,儀器本身是一種固定相。
由于其核心原理非常簡(jiǎn)單,色譜法留下了大量可以改進(jìn)的空間。 這導(dǎo)致了各種更專業(yè)的色譜技術(shù),如同時(shí)使用兩種不同色譜方法的二維色譜法,裂解氣相色譜法(用作質(zhì)譜分析的一部分)和手性色譜法(用于分離其他方法無(wú)法區(qū)分的立體異構(gòu)體)。
色譜法是一種簡(jiǎn)單且極為靈活的原理,在可以預(yù)見(jiàn)的未來(lái),它將繼續(xù)產(chǎn)生新的變化和新的實(shí)現(xiàn)。