如何計(jì)算柱效、峰不對稱因子、拖尾因子和分離度？

柱效計(jì)算

柱效以每根柱子的理論塔板數(shù)表示，計(jì)算公式為 N = 5.54 ( t _R / w _0.5 ) ² 其中 t _R 是目標(biāo)分析物的保留時(shí)間，w _0.5 是半峰高處的峰寬.

即使峰沒有與相鄰峰完全分離（分辨率差），只要峰之間的谷值低于半峰高，這種半峰高方法也可以確定每根色譜柱的理論塔板數(shù) (N)。峰的高度。 半高測量通常是數(shù)據(jù)系統(tǒng)自動(dòng)確定的首 選方法。

每根柱子的理論塔板數(shù)越大，峰越尖！ 如果您需要計(jì)算每米的理論塔板數(shù)，則必須使用以下公式：

每根色譜柱的理論塔板數(shù) x 100/HPLC 色譜柱長度 (cm)= 每米理論塔板數(shù)

峰值不對稱因子

峰不對稱因子，通常表示為 A _s 使用以下等式計(jì)算 A _s = b/a 其中 b 是從峰中點(diǎn)（ 與峰*高點(diǎn)垂直 ）到峰后緣的距離，在 10% 處測得峰高，a 是在 前緣到峰中點(diǎn)（ 峰高的 處 從峰 與峰*高點(diǎn)垂直）的距離 10% 測得的 。

拖尾因子

解析度

分辨率 (R _s ) 是分離質(zhì)量的量度。 為了確定 2 個(gè)峰之間的分離度，我們需要測量 2 個(gè)目標(biāo)峰（t 的保留時(shí)間以及 _r2 和 t _r1 ） 在基線處的兩個(gè)峰的寬度（w ₁ 和 w ₂ ）。峰的兩側(cè)。 通常計(jì)算如下：

R _s s = (t _r2 – t _r1 ) / ((0.5 * (w ₁ + w ₂ )

由于幾乎每個(gè)峰都顯示出一定程度的拖尾，因此為了允許少量拖尾并在峰之間仍然保留一點(diǎn)平坦的基線， R _s 通常需要 ≥ 2.0 以在兩個(gè)感興趣的峰之間獲得適當(dāng)?shù)姆直媛省?

該方程非常方便，并為峰分辨率計(jì)算提供了良好的結(jié)果，但僅當(dāng)峰在基線水平上分辨時(shí)才有用。 但是，我們經(jīng)常會(huì)遇到峰之間相距很小的情況。 峰在底部重疊，在基線處測量峰寬幾乎是不可能的。

在這些情況下，就像我們在中間峰高處測量效率一樣，可以使用相同的方法通過以下等式計(jì)算分離度：

R_s = (t_R2 – t_R1) / ((1.7 * 0.5 (w_0.5,1 + w_0.5,2))

其中w _0.5,1 和w _0.5,2 是在峰值高度一半測得的峰值的寬度。 請注意，將因子 1.7 添加到分母以調(diào)整半高處的寬度差異。 半高技術(shù)是許多數(shù)據(jù)系統(tǒng)測量分辨率的方式，因?yàn)樗然€寬度更容易測量。

每根色譜柱的理論塔板數(shù)（性能）/對稱因子/拖尾因子/分辨率可以并且將會(huì)根據(jù)所使用的分析類型和分析條件而變化。