薄層色譜法 是一種用于分離和分離本質(zhì)上不揮發(fā)的混合物的色譜法。 就像其他色譜過(guò)程一樣,這個(gè)過(guò)程由流動(dòng)相和固定相組成。
后者是一層薄薄的吸收材料,例如氧化鋁、硅膠或纖維素。 該層應(yīng)用于稱為惰性基材的塑料、玻璃或鋁箔片。 TLC 程序中的流動(dòng)相 是溶劑或其混合物。
如果您想了解有關(guān) 更多信息 薄層色譜程序的 ,那么您來(lái)對(duì)地方了。 在這里我們將討論它的原理、過(guò)程和在不同行業(yè)中的應(yīng)用。
我們將從 TLC 原理開(kāi)始。
薄層色譜原理
TLC 程序的分離原理基于給定化合物對(duì)流動(dòng)相和固定相的相對(duì)親和力。 該過(guò)程從在固定相表面上移動(dòng)流動(dòng)相開(kāi)始。 在此運(yùn)動(dòng)期間,與低親和力化合物相比,高親和力化合物獲得的速度更慢。 這導(dǎo)致他們的分離。
程序完成后,可以在不同水平的靜止表面上找到不同的點(diǎn),反映混合物的各種元素。 基本上,更容易被固定相吸引的化合物將它們的位置固定在較低的水平,而其他化合物則移向表面的較高水平。 因此可以相應(yīng)地看到它們的斑點(diǎn)。
在 TLC 原理之后,現(xiàn)在讓我們繼續(xù)其程序。
薄層色譜程序
從上面提到的信息,您必須清楚TLC的工作原理。 但是,您仍然需要了解其完整程序才能查看其全部功能。 TLC 程序中涉及的一些組件如下。
TLC 板: 這些用于施加薄層固定相。 它們本質(zhì)上是惰性或穩(wěn)定的。 固定相層在這些板中保持均勻,以便更好地進(jìn)行分析。 通常,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的人更喜歡即用型板。
流動(dòng)相: 這包括溶劑(或溶劑混合物)。 所使用的溶劑必須具有化學(xué)惰性、盡可能高的純度且無(wú)顆粒。 只有這樣才能形成 TLC 斑點(diǎn)。
TLC 室: 這是進(jìn)行薄層色譜程序的地方。 它使灰塵顆粒遠(yuǎn)離過(guò)程,并且不會(huì)讓溶劑蒸發(fā)。 為了適當(dāng)?shù)亻_(kāi)發(fā)斑點(diǎn),該室內(nèi)保持均勻的環(huán)境。
濾紙: 用流動(dòng)相溶液潤(rùn)濕后放置在腔室內(nèi)。 它確保流動(dòng)相在整個(gè) TLC 板的長(zhǎng)度上均勻上升。
收集完所有這些組件后,該過(guò)程就開(kāi)始了。 以下是其中的步驟:
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該過(guò)程首先用鉛筆在 TLC 板的底部做一個(gè)薄標(biāo)記。 它有助于樣品點(diǎn)的應(yīng)用。 這些點(diǎn)保持相等的距離。
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然后將樣品施加到在線制作的這些點(diǎn)上。
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然后將流動(dòng)相填充到 TLC 室底部幾厘米處。
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倒入流動(dòng)相后,將濕潤(rùn)的濾紙與腔壁內(nèi)側(cè)一起放置。 這有助于通過(guò)保持相等的濕度來(lái)避免邊緣效應(yīng)。
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*后,將準(zhǔn)備好的固定相板放入腔室內(nèi)。 此時(shí),樣品點(diǎn)保留在流動(dòng)相一側(cè)。
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然后在將板放入腔室后關(guān)閉腔室。
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一旦該過(guò)程經(jīng)過(guò)足夠的時(shí)間,取出板并使其干燥。
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*后,通過(guò)適合樣品的方法對(duì)樣品斑點(diǎn)進(jìn)行分析,例如紫外光、KMnO4 染色和碘染色。
這樣,TLC 程序就完成了。 分析完化合物后,它會(huì)以其相對(duì)遷移率的術(shù)語(yǔ)進(jìn)行描述,即計(jì)算其 Rf 值。 即使在相同的情況下,每個(gè)化合物的該值也會(huì)發(fā)生變化。
通常,這里會(huì)使用相對(duì) Rf,因?yàn)榭赡軣o(wú)法保持所有 TLC 因子恒定。 這些方面包括吸附劑、溫度、吸附劑厚度、點(diǎn)狀材料的數(shù)量和溶劑系統(tǒng)。 用于 Rf 值計(jì)算的公式為:
Rf =(樣品覆蓋的距離)/(溶劑覆蓋的距離)
薄層色譜應(yīng)用
僅僅了解TLC的原理和程序是不夠的。 您還需要了解薄層色譜的用途,以了解它在現(xiàn)實(shí)世界中的工作方式和位置。 一些標(biāo)準(zhǔn)的 TLC 應(yīng)用包括:
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作為一種分離過(guò)程,TLC 被證明對(duì)于分離由多種成分組成的藥 物制劑非常有效。
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該過(guò)程可用于檢查給定產(chǎn)品的純度。
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局部麻醉劑、鎮(zhèn)痛劑、鎮(zhèn) 靜劑、催眠藥、抗驚厥鎮(zhèn) 靜劑和類固醇等藥 物都通過(guò) TLC 程序 進(jìn)行定性測(cè)試。
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化妝品行業(yè)還使用 TLC 來(lái)檢查產(chǎn)品中是否存在防腐劑。
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可以使用 TLC 純化給定的化合物,然后與標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行比較。
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TLC 也可用于生化分析。 在這里,它可用于從尿液、血漿、血清和體液中分離生化代謝物。
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就像化妝品行業(yè)一樣,食品行業(yè)也使用 TLC 檢測(cè)防腐劑、人造色素和甜味劑。
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還可以使用 TLC 跟蹤反應(yīng)的進(jìn)度以查看它是否完成。
這些是一些典型的薄層色譜應(yīng)用,您可以在不同的地方找到它們。 但是,該程序不僅 限于這些,您還可以在許多其他行業(yè)中看到它的使用。
薄層色譜的 優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)
*后,讓我們探討一下使用薄層色譜程序的一些優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。
薄層色譜的優(yōu)勢(shì)
這些包括:
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可以毫無(wú)困難地進(jìn)一步可視化 TLC 的分離點(diǎn)。
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與其他方法相比,該色譜過(guò)程具有成本效益。
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它可以用于許多化合物,并且不需要太多時(shí)間,因?yàn)樗臁?
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這個(gè)過(guò)程比其他方法簡(jiǎn)單得多。
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TLC 使分析任何給定化合物的純度標(biāo)準(zhǔn)變得簡(jiǎn)單。
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幾種化合物可以通過(guò) TLC 輕松分離。
TLC的缺點(diǎn)
該過(guò)程的缺點(diǎn)是:
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TLC 程序 不能用于檢測(cè)下限實(shí)驗(yàn),因?yàn)樗哂泻芨叩臋z測(cè)限。
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TLC 中使用的板不具有更長(zhǎng)的固定相。
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結(jié)果再現(xiàn)在 TLC 中具有挑戰(zhàn)性。
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TLC僅 限于定性分析,不能用于定量分析。
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與其他色譜方法相比,分離長(zhǎng)度也受到限制。
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這里的過(guò)程不是在封閉系統(tǒng)中進(jìn)行的。 因此,溫度和濕度等方面會(huì)影響結(jié)果,使其不準(zhǔn)確。
我們希望所有這些信息能幫助您了解有關(guān)薄層色譜概念的一切。