柱效是在不影響分離質(zhì)量的情況下嘗試快速運(yùn)行方法的平衡。當(dāng) HPLC 分析快速運(yùn)行時(shí),您有更多時(shí)間運(yùn)行更多方法,*終節(jié)省系統(tǒng)停機(jī)時(shí)間和總體成本。幸運(yùn)的是,有三種簡(jiǎn)單的方法可以提高 HPLC 方法的速度,同時(shí)保持高質(zhì)量的結(jié)果。
其中包括:
HPLC 柱長(zhǎng)
這可能是提高方法速度的*簡(jiǎn)單方法。HPLC 色譜柱越短,運(yùn)行時(shí)間越短,這意味著可以更快地通過(guò)色譜柱運(yùn)行更多樣品。然而,柱長(zhǎng)越短,峰分離度越低。因此,平衡色譜柱長(zhǎng)度和分離度以確保獲得*佳結(jié)果至關(guān)重要。
幸運(yùn)的是,即使柱長(zhǎng)減少,也可以保持分離度。關(guān)鍵是確保滿(mǎn)足分析需求,分離主峰,并選擇合適的高效粒子來(lái)實(shí)現(xiàn)。
粒徑
固定相顆粒越小,U/HPLC 色譜柱的效率和靈敏度就越高。請(qǐng)記住,粒徑越小,系統(tǒng)中的背壓就越高,因此,這意味著在您需要完成的分離與選擇的粒徑、柱長(zhǎng)和背壓之間找到平衡。那個(gè)分離。
直接解決 HPLC 系統(tǒng)中壓力增加的一種方法是使用核殼顆粒。這些顆粒由一個(gè)實(shí)心核心組成,該核心被高孔隙率的外殼包圍。這些與小顆粒的作用相同,可提高系統(tǒng)效率和速度,而不會(huì)提高系統(tǒng)壓力。
流動(dòng)相流速
提高 HPLC 方法速度的*后一種方法是提高流動(dòng)相的流速。當(dāng)流動(dòng)相流速增加時(shí),分析物會(huì)更快地通過(guò)色譜柱,從而縮短分析時(shí)間。
同樣,由于流速的增加會(huì)降低色譜柱的效率,因此在不影響色譜柱效率的情況下,確定*佳流速以提高系統(tǒng)速度非常重要。這可以通過(guò)在 Van Deemter 圖上繪制流速和柱效來(lái)完成。
*終,當(dāng) HPLC 分析速度提高時(shí),可以在1天中運(yùn)行更多樣品,從而提高整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的工作效率。關(guān)鍵不是為了速度而犧牲柱效或峰分離度,而是要仔細(xì)平衡柱長(zhǎng)、粒徑和流動(dòng)相流速。