質(zhì)譜(MS)是液相色譜(LC)流行的檢測(cè)技術(shù)之一。該技術(shù)也與LC-UV(UV)檢測(cè)中使用的許多流動(dòng)相緩沖液和溶劑不兼容。除此之外,LC-MS檢測(cè)還必須考慮HPLC色譜柱的尺寸。
所有這些都意味著,與為其他檢測(cè)系統(tǒng)選擇色譜柱相比,為L(zhǎng)C-MS選擇合適的HPLC色譜柱需要考慮更多。在這里,我們概述了為L(zhǎng)C-MS選擇HPLC色譜柱時(shí)的幾個(gè)重要考慮因素
選擇合適的色譜柱固定相
這是為L(zhǎng)C-MS選擇HPLC色譜柱時(shí)重要的考慮因素。色譜柱種類(lèi)繁多,包括反相、正相和離子交換。
反相非常適合LC-MS,因?yàn)樗梢允褂盟嗪陀袡C(jī)流動(dòng)相組合對(duì)多種化合物進(jìn)行高分辨率分離。
離子交換柱需要與質(zhì)譜儀不兼容的無(wú)機(jī)緩沖溶液。如果離子交換柱必須與質(zhì)譜儀(MS)一起使用,請(qǐng)確保使用與MS檢測(cè)兼容的揮發(fā)性緩沖液和溶劑。在將樣品注入LC-MS之前,您還應(yīng)該對(duì)樣品進(jìn)行脫鹽。
使用揮發(fā)性緩沖液
緩沖液用于通過(guò)保持流動(dòng)相的pH值來(lái)幫助獲得良好的峰形、分離度和選擇性。雖然有許多潛在的緩沖液可供選擇,但對(duì)于LC-MS,您應(yīng)該使用含有銨鹽的揮發(fā)性緩沖液,而不是磷酸鹽緩沖液等非揮發(fā)性緩沖液。
如果可能,通常應(yīng)避免在LC-MS中使用與任何離子化合物和固定相形成離子和共價(jià)鍵配合物的離子對(duì)試劑。如果不可能,則僅使用這些試劑的揮發(fā)性形式。
無(wú)論您將哪種HPLC色譜柱用于LC-MS,請(qǐng)務(wù)必根據(jù)制造商的規(guī)格進(jìn)行制備和調(diào)節(jié),并保持其清潔。這將有助于延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命,并確保您獲得所需的結(jié)果。