掩蔽殘余硅醇基的影響，談?wù)劮逦驳募夹g(shù)原理
在色譜柱的挑選中，我們經(jīng)常會(huì)看到有些廠家大肆宣傳一次封尾、二次封尾、三次封尾等，但是很多實(shí)驗(yàn)人員都不大清楚到底什么是封尾，多次封尾有區(qū)別嗎？
在以前技術(shù)不是很成熟的時(shí)代，十八烷基不能完全鍵和到硅膠表面，從而硅膠上總是會(huì)有百分之幾的硅羥基裸露在外面。
這會(huì)造成很多樣品特別是堿性物質(zhì)，在進(jìn)行色譜分離時(shí)，吸附或者鍵和在這部分硅羥基上，導(dǎo)致峰拖尾。
當(dāng)時(shí)使用三乙胺作為掃尾劑，先行與硅羥基吸附，可以使峰型改善，這個(gè)三乙胺還一度成為分析界的寶貝呢。
現(xiàn)代制造填料的技術(shù)日趨成熟，人們已經(jīng)掌握了把這部分剩余未鍵和硅膠也進(jìn)行鍵和鈍化的技術(shù)，這個(gè)技術(shù)就叫做封尾。
上面說到的一次封尾、二次封尾、三次封尾，幾次表示的是封端的次數(shù)，為的就是屏蔽更多的硅醇基。但是無論再進(jìn)行多少次封端，仍有硅醇基是裸露的，只能說盡可能的規(guī)避多些。
那么堿性化合物在硅膠基質(zhì)上的拖尾的機(jī)理是怎樣的呢？
我們先看一下使用一般的硅膠基質(zhì)C18分析時(shí)，流動(dòng)相pH值對(duì)峰型的影響：
-
當(dāng)流動(dòng)相pH值小于3時(shí), 硅醇基呈中性(未解離)；
-
而當(dāng)流動(dòng)相為pH6-8時(shí), 硅醇基帶負(fù)電性(大部解離)，這樣會(huì)加大對(duì)堿性化合物的保留（原來疏水性，而現(xiàn)在不但有疏水性保留還有解離后的硅醇基的離子交換作用），導(dǎo)致峰型拖尾。
那么有人就會(huì)問了既然pH< 3時(shí)硅醇基離解受抑制，為何不在所有情況下采用酸性條件進(jìn)行分離?
在使用一般的硅膠基質(zhì)C18分析堿性物質(zhì)的時(shí)候，為了規(guī)避硅羥基的影響，我們常要添加掃尾劑（如：三乙胺、二乙胺、三氟乙酸等）。但這些殘留的部分硅醇基也參與對(duì)化合物的吸附分配作用。而且由于掃尾劑大多是強(qiáng)酸強(qiáng)堿物質(zhì)，長(zhǎng)期使用會(huì)對(duì)色譜柱柱床會(huì)產(chǎn)生腐蝕而影響柱壽命和重現(xiàn)性。
故對(duì)堿性物質(zhì)的分離分析，為了達(dá)到良好的對(duì)稱峰型，有些廠商(*早是色譜科兩步合成法)推出了極性嵌入改性C18。
技術(shù)原理就是在固定相C18鏈中通過化學(xué)合成，插入了像酰胺基、氨基、醇類、脂類的一些基團(tuán)，使得流動(dòng)相中的水相在嵌入基團(tuán)處富集水層，待測(cè)物質(zhì)在水層與C18烷基鏈中完成分配與再分配，*終起到了屏蔽硅膠表面硅醇基的作用。便可在少量拖尾劑的情況下獲得優(yōu)異的峰型。
因?yàn)橛星度霕O性基團(tuán)的緣故，使得該類型色譜柱可兼容100%的水相，適合堿性或酚酸類物質(zhì)分析。
該類型色譜柱市面上有如Supelco Discovery RP-Amide，Waters symmtry sheild C18，ACEC18-Amide，Zorbax Bonus-RP，Ecosil C18 EPS等。
這類型色譜柱目前已被USP收錄，編號(hào)L60。但是因內(nèi)嵌極性基團(tuán)的配體與直鏈烷烴配體有差異，故選擇性不同。
這種選擇性的差異有時(shí)對(duì)分析能起到很大的作用，例如用使用Ecosil-C8-EPS在相同流動(dòng)相下分析呋喃唑酮(痢特靈)雜質(zhì)。SH沒分離開，而EPS是能出很好譜圖的。
只有清楚了解色譜柱技術(shù)的細(xì)節(jié)，我們才能更好的根據(jù)試驗(yàn)需求選擇合適的色譜柱。這期的Poin，你get到了嗎？
