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薄層原理和應用、可能用到的儀器耗材
薄層色譜(Thin LayerChromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。是近年來發(fā)展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點。一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;另一方面若在制作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點成一條線,則可分離多達500mg的樣品。因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物資。此外,在進行化學反應時,常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應是否完成。
薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板(10×3cm左右)上均勻的涂一層吸附劑或支持劑,帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點線上,涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi),浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時,將色譜板取出,干燥后噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。記下原點至主斑點中心及展開劑前沿的距離,計算比移值(Rf):
薄層色譜儀
薄層色譜法簡稱TLC,是在50年代從經(jīng)典柱色譜法和紙色譜法基礎上發(fā)展起來的一種色譜技術(shù)。60年代后,人們對薄層色譜法的標準化、規(guī)范化及擴大應用等方面進行了許多工作,使該方法日趨成熟。
薄層色譜法工作的過程是這樣的:
首先將要分離的混合物點在用固定相均勻涂布的薄板的一端;
然后將薄板的這一端浸入流動相,在流動相浸濕薄板的過程中,樣品隨著流動相被展開,不同的組分隨流動相以不同的速度向前移動,*終保留在薄板上的不同位置,從而達到分離的目的;
再用適當?shù)姆椒▽Σ煌慕M分進行檢測,就可以定性或定量的對樣品作出分析。
此時的固定相被稱為載體或吸附劑,而流動相被稱為展開劑,被展開的樣品叫做斑點。
由于通常用薄層色譜分析法進行定量分析的過程中,薄層掃描儀是*為重要的,因此對它進行略詳?shù)慕榻B。
薄層掃描儀的基本結(jié)構(gòu)及主要功能基本是相同的,每臺儀器都包括光源、分光器、檢測器、數(shù)據(jù)處理及信號輸出幾個部分。
典型的檢測方法是吸收檢測法,其基本測定原理為,用一束長寬可以調(diào)節(jié)的一定波長、一定強度的光照射到薄層斑點上進行整個斑點或被斑點反射的光束,根據(jù)光束被斑點吸收后強度的變化來確定組分的含量。薄層色譜法的優(yōu)點特別適合我國國情,已成為許多實驗室不可缺少的分離手段。該方法在科研、教學、臨床、生產(chǎn)等各個領域中廣泛應用,分離對象也無所不包。
目前它正向聯(lián)用的方向發(fā)展,如薄層色譜--氣相色--質(zhì)譜聯(lián)用,或都薄層色譜--紅外光譜等的聯(lián)用。
醫(yī)藥工業(yè)
薄層色譜在醫(yī)藥工業(yè)中有很廣泛的應用,特別應用在***、中成藥的成分分析和合成**分析。
臨床醫(yī)學
在臨床醫(yī)學中,它主要用于對生物樣品和有毒的物質(zhì)進行分析。
環(huán)境科學
薄層色譜可以用來進行農(nóng)藥及農(nóng)藥殘留分析,或都對有毒金屬、多環(huán)芳烴進行檢測。
食品化學
食品添加劑的**性問題已經(jīng)越來越多的得到關(guān)注,用薄層色譜對食品添加劑進行分析是一種簡單有效的方法。
化學化工
薄層色譜在化學、化工方面也有很多應用,例如對高分子材料的助劑、填料等進行分析。
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