HPLC柱溫控
在高效液相色譜儀中，需要高效液相色譜柱和一些檢測(cè)器來精 確控制工作環(huán)境的溫度，對(duì)色譜柱恒溫的要求非常高。溫度對(duì)溶劑的溶解度、HPLC 色譜柱的性能和流動(dòng)相的粘度都有影響。一般來說，升高溫度可以增加溶質(zhì)在流動(dòng)相中的溶解度，從而降低其分配系數(shù)，但對(duì)分離選擇性影響不大；它還可以降低流動(dòng)相的粘度，從而改善傳質(zhì)過程，降低柱壓。但是，如果溫度過高，則容易在流動(dòng)相中造成氣泡。
HPLC柱溫變化
不同的探測(cè)器對(duì)溫度的敏感度不同。HPLC柱的不同工作溫度對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)保留時(shí)間有影響。在凝膠色譜中使用軟填料時(shí)，溫度會(huì)引起填料結(jié)構(gòu)的變化，從而影響分離。但是，如果使用硬填料，效果并不顯著。
高效液相色譜柱的保護(hù)和再生
在色譜分析系統(tǒng)中，高效液相色譜柱主要起到分離和檢測(cè)物質(zhì)的作用，如色譜系統(tǒng)的心臟，也是易損產(chǎn)品。一些保留值較小的物質(zhì)，如鹽類，更容易被沖入色譜柱，而另一些保留值較強(qiáng)的物質(zhì)，流動(dòng)相溶液不足以洗脫這些物質(zhì)。
在多次取樣后，這些吸附在柱子表面的物質(zhì)通常會(huì)積聚在柱頭中。當(dāng)吸附的樣品組分積累到一定程度時(shí)，就會(huì)形成新的固定相，改變分離機(jī)理，使樣品保留時(shí)間發(fā)生波動(dòng)，出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象。
為延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命，曾有人指出應(yīng)在分析柱前接小保護(hù)柱。作用是收集和阻擋來自進(jìn)樣器的機(jī)械和化學(xué)雜質(zhì)，以保護(hù)和延長(zhǎng)分析柱的使用壽命。
因此，選擇保護(hù)柱的原則是在滿足分離要求的前提下，盡可能選擇分離樣品保留率低的短保護(hù)柱。
