在HPLC分析過程中，由于各種原因，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一些異常峰形，嚴(yán)重影響分析結(jié)果，給實(shí)驗(yàn)者帶來(lái)很大的困擾。在這里介紹了一些常見的峰形狀和可能的原因，我們將了解它們是否與HPLC柱有關(guān)。
1、無(wú)峰值
可能的原因：
a、進(jìn)樣不成功，或樣品未溶解在溶劑中，或樣品分解變質(zhì)或樣品濃度過低；
b、液相色譜儀本身的問題：泵或檢測(cè)器故障；
C、流動(dòng)相選擇不當(dāng)。比如反相硅膠柱，如果流動(dòng)相極性太大，一些小的極性物質(zhì)就洗不掉，這些物質(zhì)殘留在柱子里，就不會(huì)出峰；
d、探測(cè)器不合適。例如，有些產(chǎn)品沒有紫外線吸收或吸收很弱，但使用紫外線檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。
2、平頭峰
可能的原因：
a、樣品濃度過大或進(jìn)樣量過大，也是主要原因；
b、液相色譜的檢測(cè)器設(shè)置不正確。
3、負(fù)峰
可能的原因：
a、流動(dòng)相吸收背景值過高；
b、采樣過程中有空氣進(jìn)入；
C、樣品組分的吸收低于流動(dòng)相的吸收；
d、所制備樣品的溶劑與流動(dòng)相不一致。
4、肩峰
可能的原因：
a、進(jìn)樣量過大，樣品濃度過高；
b、保護(hù)柱或柱頭堵塞；
C、保護(hù)柱或色譜柱被污染或失效；
d、柱頭塌陷。
5、分叉峰
可能的原因：
a、溶劑效應(yīng)：用于溶解樣品的溶劑與初始流動(dòng)相的極性相差太大；
b、保護(hù)柱或柱頭堵塞；
C、保護(hù)柱或色譜柱被污染或失效；
d、柱頭塌陷。
6.鬼峰
可能的原因： 鬼峰出現(xiàn)在某個(gè)光譜中，做同樣的條件后可能不會(huì)再出現(xiàn)。有時(shí)沒有峰值。
a、對(duì)于進(jìn)樣閥的殘留峰，每次進(jìn)樣后要花足夠的時(shí)間平衡和清潔系統(tǒng)；
b、樣品中存在未知物，改善樣品的前處理；
C、如果流動(dòng)相被污染，更換新的流動(dòng)相（或更換品牌）；盡量準(zhǔn)備現(xiàn)用，再次使用時(shí)過濾過夜流動(dòng)相；
d、流道內(nèi)有小氣泡，打開吹掃閥增加流量消除。
7、凸峰
可能的原因：
a、進(jìn)樣量或樣品濃度高；
b、溶解樣品的溶劑比流動(dòng)相極性更大；
C、保護(hù)柱或色譜柱被污染或失效；
d、如果流動(dòng)相不合適，更換新的（調(diào)整pH值或改變類型、比例等）。
8、拖尾峰
可能的原因：
a、進(jìn)樣量或樣品濃度高；
b、如果流動(dòng)相不合適，更換新的（調(diào)整pH值或改變類型、比例等）；
C、硅烷醇作用：加入三乙胺，用堿誘導(dǎo)鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度，降低流動(dòng)相的pH值，鈍化樣品；
d、柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效：更換燒結(jié)不銹鋼，增加在線過濾器，過濾樣品；
e、柱頭塌陷或柱效降低：更換色譜柱。
