凝膠純化色譜
凝膠色譜是 1960 年代初期發(fā)展起來的一種分離和分析技術(shù)。 根據(jù)分離的對象是否為水溶性物質(zhì),凝膠色譜可分為凝膠過濾色譜(GFC)和凝膠滲透色譜(GPC)。
凝膠純化色譜是我們今天要介紹的一種凝膠滲透色譜(GPC)。
什么是凝膠純化色譜法?
凝膠純化色譜是凝膠滲透色譜作為樣品預(yù)處理方法的主要應(yīng)用之一。
凝膠純化色譜法是一種以惰性多孔凝膠為固定相的高效液相色譜(HPLC)方法,它主要基于尺寸排阻原理根據(jù)分子大小的差異來分離物質(zhì)。
凝膠純化色譜分離原理
當(dāng)含有各種分子的樣品溶液緩慢流過凝膠柱時,分子同時以兩種不同的方式運(yùn)動:垂直運(yùn)動和靜止運(yùn)動。
由于直徑大,大分子物質(zhì)不易進(jìn)入凝膠顆粒的微孔中,只能分布在顆粒中。 因此,在洗脫過程中向下移動的速度更快。
小分子不僅可以在凝膠顆粒之間的間隙中擴(kuò)散,還可以進(jìn)入凝膠顆粒的微孔,即進(jìn)入凝膠相。
在向下移動的過程中,小分子擴(kuò)散到一個凝膠的縫隙中,然后進(jìn)入另一個凝膠。 它們不斷地?cái)U(kuò)散和進(jìn)入,所以它們向下移動的速度比大分子要慢。
樣品中的大分子先流出色譜柱,中等分子跟隨,*后流出*小分子。