氨基(NH2)柱使用一段時間后，是否遇到柱效降低、柱壓升高？或干擾峰異常、保留時間漂移？或某些色譜下方法無法重現(xiàn)條件？還是分辨率、塔板、拖尾因子達(dá)不到檢測要求？NH2柱的獨特性給我們帶來了很多麻煩，所以今天我們就來聊聊NH2柱。
NH2柱的鍵合官能團是氨基丙基，比傳統(tǒng)的C18、C8和C4更容易水解。因此，在使用NH2柱之前，我們必須有一個心理準(zhǔn)備，NH2柱的壽命比常規(guī)柱要短很多。
NH2 柱可用作正相或反相。由于兩相中使用的溶劑不混溶，因此需要使用異丙醇進行過渡以在正相和反相之間切換。下面分別討論反相和正相NH2柱的使用和維護。
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反相
如果流動相中不含任何酸、堿或鹽，則樣品檢測后應(yīng)用 100% 乙腈沖洗并保存 NH2 柱。如果流動相含有酸、堿或鹽類，先用 60% 乙腈沖洗色譜柱 40 分鐘，然后用 100% 乙腈沖洗并儲存。
反相使用時，注意流動相的pH范圍。pH值越低，水解越容易。理想的 pH 值范圍是 3-7。此外，流動相中水的比例越高，水解越容易。
使用后，建議將色譜柱沖洗并存放在純有機相中，以獲得良好的保存效果并延長使用壽命。另外，如果色譜柱出現(xiàn)高壓、峰形異常、柱效低或分離度低等異常情況，可先用過渡流動相沖掉鹽分，然后按如下方式?jīng)_刷：100%乙腈→100%甲醇→100%異丙醇→ 100% 乙腈以分析流速每步 30 分鐘，而異丙醇由于其高粘度需要較低的流速。
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正常階段
色譜柱應(yīng)用100%正己烷沖洗，并用正己烷/異丙醇 (90/10)儲存。
在正相模式下，固定相的含水量是影響選擇性的關(guān)鍵參數(shù)，而流動相的含水量影響保留時間和分離度，因此當(dāng)固定相和固定相的含水量之間時，保留時間很容易發(fā)生偏移。流動相變化。建議去除氨基柱中的水。
建議：
1、去除固定相中的水：
用30倍柱體積的含有 2.5% 二甲氧基丙烷和 2.5% 冰醋酸的正己烷沖洗色譜柱。
2、使用控制水含量的流動相
半飽和流動相法：將無水非極性流動相分成兩半。 一半加入一定量的水，然后混合攪拌約1小時。 靜態(tài)分層后，除去多余的水相，將兩半重新混合在一起形成“半飽和”流動相。
如果色譜柱出現(xiàn)高壓、峰形異常、柱效低或分離度低等異常情況，請按以下步驟沖洗色譜柱：100% 異丙醇 → 100% 甲醇 → 100% 異丙醇，分析流速每步 40 分鐘，而異丙醇由于其高粘度，需要較低的流速。
